鲁本h舰队科学中心

文摘:通过荧光素酶催化的发光和绿色荧光蛋白荧光实时显示肿瘤特异性扩增过程，揭示了肿瘤和转移的位置。大肠杆菌和三种减毒病原体(霍乱弧菌、鼠伤寒沙门氏菌和单核增生李斯特菌)都进入肿瘤并复制。这些发现表明，既没有营养不良突变，也没有痘苗病毒缺乏胸苷激酶基因，在患有同基因和异基因肿瘤的具有免疫功能的啮齿动物和免疫功能受损的啮齿动物中，我们观察到发光微生物对肿瘤的定位。基于它们“发现肿瘤”的性质，细菌和病毒可能被设计为携带多种基因来检测和治疗癌症

文摘:此前，我们报道了一种携带发光融合基因的重组痘苗病毒(VACV)进入、复制并揭示小鼠肿瘤的位置。短句来源将3个表达片段(编码肾荧光素酶-绿光荧光蛋白融合、β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖醛酸酶)分别插入病毒基因组的F14.5L、J2R(编码胸苷激酶)和A56R(编码血凝素)位点，构建了一种新型重组VACV GLV-1h68，作为一种同时诊断和治疗的药物。将GLV-1h68(每只小鼠1 × 107个斑块形成单位)静脉注射到已建立(~ 300-500 mm3) s.c GI-101A人类乳腺肿瘤的裸鼠中，用于评估其毒性、肿瘤靶向特异性和溶瘤疗效。GLV-1h68与其亲本LIVP株相比，显示出更高的肿瘤靶向特异性和更低的毒性。在95%的测试小鼠中，GLV-1h68定殖的肿瘤表现出生长、抑制和消退阶段，随后肿瘤在130天内根除。基于减少的光发射实时监测活体动物的肿瘤消退，从而证明了溶瘤病毒介导的联合肿瘤诊断和治疗系统的概念。基于小鼠特异性平台的退化肿瘤的转录分析显示了与免疫防御激活一致的基因表达特征，包括ifn刺激的基因(STAT-1和IRF-7)、细胞因子、趋化因子和先天免疫效应功能。这些发现表明，免疫激活可能与病毒溶瘤结合，在该模型中诱导肿瘤根除，为设计人类癌症溶瘤病毒疗法提供了新的视角。[Cancer Res 2007;67(20): 10038-46]

文摘:肿瘤的溶瘤病毒治疗在临床前和临床研究中都显示出良好的效果。在这里，我们研究了一种具有复制能力的痘苗病毒GLV-1h68在细胞培养和裸鼠中对人胰腺癌的治疗效果。我们发现GLV-1h68能够在体外感染、复制和溶解肿瘤细胞。病毒介导的标记基因表达易于检测。此外，单次静脉注射GLV-1h68可有效治疗s.c. PANC-1胰腺肿瘤异种移植。以最小的毒性杀死癌症。在均质器官和PANC-1肿瘤中的病毒滴度分析表明，突变病毒几乎只存在于肿瘤中，而不存在于健康器官中。注射病毒2个月后，除脾脏轻度肿大外，其他器官未见组织病理改变。令人惊讶的是，s.c. MIA PaCa-2胰腺肿瘤的治疗效率与PANC-1肿瘤相似，尽管它们在细胞培养中对病毒裂解的敏感性上存在显著差异。当GLV-1h68溶瘤病毒治疗联合顺铂或吉西他滨治疗PANC-1肿瘤时，与单独病毒治疗相比，联合治疗可增强和加速治疗效果。 Profiling of proteins related to immune response revealed a significant proinflammatory immune response and marked activation of innate immunity in virus-colonized tumors. In conclusion, the GLV-1h68 strain showed outstanding therapeutic effects and a documented safety profile in mice, with great promise for future clinical development.

文摘:我们之前报道了复制能力痘苗病毒(VACV) GLV-1h68作为单一治疗方式以及联合化疗在不同动物模型中显示出显著的溶瘤活性和疗效[Yu YA, et al. (2009) Mol Cancer Ther 8:141-151]。在这里，我们报道了3株编码GLAF-1的VACV株，这是一种以前未见过的工程单链抗体(scAb)。这种独特的结痂是由3种牛痘启动子(合成的早期，早期/晚期和晚期)转录而成，并针对人类和小鼠的vegf。GLAF-1在细胞培养中表达。此外，所有表达glaf -1的VACV株在细胞培养中的复制效率与亲本GLV-1h68病毒相似。在单次静脉注射该病毒后，在异种肿瘤移植中获得了成功的肿瘤特异性递送和来自单个VACV株的功能性scAb的持续生产。与用亲本病毒GLV-1h68治疗人肿瘤移植相比，表达scAb的VACV株表现出明显增强的治疗效果。这种增强的疗效与一次性静脉注射GLV-1h68和多次静脉注射Avastin的肿瘤治疗相媲美。总之，vacv在定植肿瘤中介导的免疫治疗性抗vegf结痂的传递和产生可能为一种独特的治疗概念开辟了道路:肿瘤特异性，局部放大的人类药物治疗。

文摘:我们对2例接受不同形式免疫治疗后出现混合反应的黑色素瘤患者的15个转移灶(10个消退，5个进展)进行了基因表达比较分析。全基因组转录分析清楚地表明，在这两例患者的所有转移性黑色素瘤中，黑色素瘤转移的消退是由于参与抗原呈递和干扰素介导反应(STAT-1/IRF-1)的基因上调介导的急性免疫排斥反应。相比之下，进展性转移显示低转录水平的基因参与这些途径。组织学分析显示，转移灶中有T细胞和HLA-DR阳性浸润细胞，进展性转移灶中无浸润细胞。HLA- a,B和C基因在肿瘤显微切片上的定量表达分析表明，HLA在转移性肿瘤中的表达高于进展性转移。在黑色素瘤排斥反应中获得的分子标记似乎与在其他形式的免疫介导的组织特异性排斥反应中观察到的分子标记相似，如同种异体移植物、病原体清除、移植物抗宿主或自身免疫性疾病，支持排斥反应的免疫常数。我们认为决定免疫治疗成功或失败的主要因素是肿瘤细胞中HLA I类改变的性质，而不是所使用的免疫治疗类型。如果免疫治疗可逆转分子改变，则HLA表达上调，病变被识别和排斥。相反，如果缺陷是结构性的，MHC I类表达将保持不变，病变将继续发展。